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上海交通大學藥學院OVA誘導哮喘動物模型介紹

釋出時間◕◕╃:2022-09-08 00:00:00      點選次數◕◕╃:882

基本介紹

哮喘的發生發展與遺傳✘·✘·、免疫✘·✘·、環境和藥物作用等有關₪✘▩☁,其誘發因素包括過敏原✘·✘·、  病毒感染✘·✘·、刺激物✘·✘·、運動等☁││✘·。 其病理特點為Th2淋巴細胞免疫反應強₪✘▩☁, IL-4✘·✘·、 IL-5✘·✘·、 IL-13增強₪✘▩☁,導致嗜酸性粒細胞浸潤增多✘·✘·、粘液分泌增多✘·✘·、支氣管高反應性(BHR)✘·✘·、 免疫球蛋白E (IgE)合成和組織重塑☁││✘·。 臨床表現為氣喘✘·✘·、胸悶✘·✘·、咳嗽等症狀₪✘▩☁,多發生 在夜間或凌晨₪✘▩☁,因此建立可靠的哮喘動物模型對於探究哮喘的發病機制₪✘▩☁,發現藥物 作用靶點具有重要意義☁││✘·。

目前哮喘模型選取的動物主要用BALB/c 小鼠✘·✘·、C57小鼠✘·✘·、  SD 大鼠✘·✘·、  Wistar 大鼠和 豚鼠等☁││✘·。用於誘導哮喘的誘導劑包括卵清蛋白( OVA)₪✘▩☁,塵蟎✘·✘·、豚草✘·✘·、麴黴屬真菌   混合物( DRA),屋塵蟎( HDM )等₪✘▩☁,其中OVA最廣為應用☁││✘·。常用的造模方式包括氣 管給藥✘·✘·、鼻腔滴入✘·✘·、霧化吸入等☁││✘·。

檢測指標

肺泡灌洗液

1. 各組總細胞數的變化

2. 各組總蛋白濃度的變化

3.  ELISA檢測哮喘相關細胞因子◕◕╃:IL-4,IL-5,IL-13等變化

OVA造模組₪✘▩☁,肺泡灌洗液中蛋白總量以及細胞的總數明顯增加₪✘▩☁,藥物作用 後₪✘▩☁,蛋白總量和細胞總數均有所減少₪✘▩☁,說明藥物作用之後哮喘得到緩解☁││✘·。

流式檢測各組嗜酸性粒細胞✘·✘·、巨噬細胞比例的變化

OVA未造模組肺泡灌洗液主要是巨噬細胞₪✘▩☁, OVA造模之後₪✘▩☁,嗜酸性粒細胞顯 著增加₪✘▩☁,巨噬細胞減少☁││✘·。在OVA造模組₪✘▩☁,藥物作用之後₪✘▩☁,嗜酸性粒細胞未明 顯增加₪✘▩☁,巨噬細胞未明顯減少☁││✘·。

血清

1. 各組總Ig E的變化

2. 各組OVA特異性Ig E的變化

肺組織

1. Western blot  檢測各組蛋白的變化₪✘▩☁,如Muc5ac, Fizz, Arg 等

2. q-PCR 檢測各組mRNA的變化₪✘▩☁,如IL-4,IL-5, IL- 13, IL-25, TSLP, GM-CSF等☁││✘·。

3. H&E 染色檢測各組炎性細胞浸潤的變化

4. PAS 染色檢測各組糖原產生的變化

相關參考文獻◕◕╃:

AMFR drives allergic asthma development by promoting alveolar macrophage–derived GM-CSF production.

 

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