上海交通大學藥學院OVA誘導哮喘動物模型介紹

基本介紹

哮喘的發生發展與遺傳•₪·、免疫•₪·、環境和藥物作用等有關☁₪╃╃•，其誘發因素包括過敏原•₪·、  病毒感染•₪·、刺激物•₪·、運動等☁▩✘✘。 其病理特點為Th2淋巴細胞免疫反應強☁₪╃╃•， IL-4•₪·、 IL-5•₪·、 IL-13增強☁₪╃╃•，導致嗜酸性粒細胞浸潤增多•₪·、粘液分泌增多•₪·、支氣管高反應性(BHR)•₪·、 免疫球蛋白E (IgE)合成和組織重塑☁▩✘✘。 臨床表現為氣喘•₪·、胸悶•₪·、咳嗽等症狀☁₪╃╃•，多發生 在夜間或凌晨☁₪╃╃•，因此建立可靠的哮喘動物模型對於探究哮喘的發病機制☁₪╃╃•，發現藥物 作用靶點具有重要意義☁▩✘✘。

目前哮喘模型選取的動物主要用BALB/c 小鼠•₪·、C57小鼠•₪·、  SD 大鼠•₪·、  Wistar 大鼠和 豚鼠等☁▩✘✘。用於誘導哮喘的誘導劑包括卵清蛋白（ OVA）☁₪╃╃•，塵蟎•₪·、豚草•₪·、麴黴屬真菌   混合物（ DRA）,屋塵蟎（ HDM ）等☁₪╃╃•，其中OVA最廣為應用☁▩✘✘。常用的造模方式包括氣 管給藥•₪·、鼻腔滴入•₪·、霧化吸入等☁▩✘✘。

檢測指標

肺泡灌洗液

1. 各組總細胞數的變化

2. 各組總蛋白濃度的變化

3.  ELISA檢測哮喘相關細胞因子•₪│：IL-4,IL-5,IL-13等變化

在OVA造模組☁₪╃╃•，肺泡灌洗液中蛋白總量以及細胞的總數明顯增加☁₪╃╃•，藥物作用 後☁₪╃╃•，蛋白總量和細胞總數均有所減少☁₪╃╃•，說明藥物作用之後哮喘得到緩解☁▩✘✘。

流式檢測各組嗜酸性粒細胞•₪·、巨噬細胞比例的變化

OVA未造模組肺泡灌洗液主要是巨噬細胞☁₪╃╃•， OVA造模之後☁₪╃╃•，嗜酸性粒細胞顯 著增加☁₪╃╃•，巨噬細胞減少☁▩✘✘。在OVA造模組☁₪╃╃•，藥物作用之後☁₪╃╃•，嗜酸性粒細胞未明 顯增加☁₪╃╃•，巨噬細胞未明顯減少☁▩✘✘。

血清

1. 各組總Ig E的變化

2. 各組OVA特異性Ig E的變化

肺組織

1. Western blot  檢測各組蛋白的變化☁₪╃╃•，如Muc5ac, Fizz, Arg 等

2. q-PCR 檢測各組mRNA的變化☁₪╃╃•，如IL-4,IL-5, IL- 13, IL-25, TSLP, GM-CSF等☁▩✘✘。

3. H&E 染色檢測各組炎性細胞浸潤的變化

4. PAS 染色檢測各組糖原產生的變化

相關參考文獻•₪│：

AMFR drives allergic asthma development by promoting alveolar macrophage–derived GM-CSF production.